ヒト胎盤抽出物の皮内反応による癌スクリーニングに関する研究

 

疫学および発生学研究所、中国予防医学アカデミー、張建林

 

中国科学アカデミー武漢ウイルス学研究所

 

湖北省沙石第一人民病院

 

1962年、Songyuan Zhengxiangは、ヒト胎盤と癌組織の生物学的側面が似ていることを発見し、癌組織の代わりにヒト胎盤から抗原を抽出し、患者の皮膚テストを実施しました。 5％そのため、1972年以来、国立がんセンターではがん検診にこの方法を使用してきましたが、いくつかの機関で報告されていますが、まだ宣伝されていません。安全性、特にB型肝炎抗原保有の問題など、促進が困難な問題については、各製品の力価を健康な人々や有効期間などで測定する必要があります。私たちはこれらの問題を研究し解決し、この法律を推進するための基礎を築きました。

 

材料および方法

 

1.1ヒト胎盤抽出物の調製：新鮮で健康な満期の最初の健康な母親のヒト胎盤を採取し、それがB型肝炎表面抗原を有するかどうかを調べるためにラジオイムノアッセイによって胎盤血清を調べる。胎盤をアルパカと血管に切り、小片に切り、すすぎながら絞って、3倍量の無水エタノールにまっすぐに入れ、混合して40℃の冷蔵庫に一晩入れる。翌日濾紙で濾過し、濾取した沈殿物を濾紙付き４０℃の冷蔵庫に入れて乾燥し、剥がした後、０．４％フェノール、０．９％ＮａＣｌ蒸留水を加えて３％（Ｗ ／ Ｖ）とした。溶液冷蔵庫を一晩置いた後、それを粉砕しそしてガラスティッシュグラインダーで混合し、フィルターを取り除き、そして清澄な液体は吸引濾過後の胎児体板抽出物である。

 

上記抽出物をブロス培地および固層穿孔培養に10日間接種したところ、苗の生長は認められなかった。 １８〜２０ｇの体重のマウス１０匹を取り、一方の群には対照を注射せず、そして他方の群には安全性試験のために１：８希釈のヒト胎盤抽出物を注射した。観察から３０分後、２４時間後、４８時間後、および７２時間後に、２つの群のマウスは異常な反応を示さなかった。

 

1.2力価の決定と保存：国内および国際的な補充の力価を測定する方法は、抽出物を様々な濃度に希釈してから、7〜8人の健康な人々をある濃度で接種し、18〜20mmの間の皮膚反応濃度を選択することです。適切な濃度です（この濃度が効力です）。しかし、この方法はより面倒で促進が難しいため、72型分光光度計に切り替えました。秤量後、５０℃の蒸留水を添加し、混合物をスターラー（１２０００ｒ ／分）で１分間２回撹拌してホモジネートを形成させ、２０℃で一晩凍結させた。翌日、４℃および室温で融解し、５０℃の蒸留水を加え、それを胎盤の重量の３倍にし、均一に攪拌し、ｐＨを６．０に調整し、４０℃の水浴にセットし、時計回りに１時間毎に１回攪拌する。 １０時間後、４０℃の冷蔵庫は一晩であった。取り出した後、それを２層のガーゼで濾過し、沈殿物を廃棄し、濾液のｐＨを０．１Ｎ ＮａＯＨで６．４に調整し、冷蔵庫を一晩７０００ｒｐｍで遠心分離し、上清を４０℃で保存し、沈殿物を２回蒸留水で加えた。 NaOHでpHを6.8に調整し、上記のように遠心分離し、沈殿物を捨て、上清中のpHを7.2に調整し、次いで冷蔵庫を一晩セットし、上記のように遠心分離し、そして上清のpHを8.5に調整する。最後に、遠心分離によって得られた最小の沈殿物をpH 6.4の冷蔵庫に保存されている上清と混合し、容量を測定し、異なる濃度（1：4、1：6、1：1）でヒト注入試験の代わりにODを測定する。 ８）健康な人に注射して反応を観察し、同時にＯＤ ５４０値を測定し、そして皮膚反応サイズが正確に１８〜２０ｍｍでありそしてＯＤが１：６で０．０６であることを見出す。

 

この試験では、力価は液体貯蔵法によって保存されるべきであり、それは０．０５ＯＤに達するべきであり、４ヶ月の貯蔵後の原液は１：５に希釈されるべきでありそして７〜１２ヶ月の貯蔵後にそれは１：３に希釈されるべきである。

 

１．３皮膚試験法：手のひらの１／３側中央の患者の前腕に、７５％アルコール除去後、ヒト胎盤抽出物０．２ｍｌを結核注射器で皮内注射し、４時間後に反応を観察して記録した。

 

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2.1応答安全性3年間で、455例の皮膚アレルギーの既往歴のない1例が皮膚アレルギーの既往歴がなく、体温がわずかに上昇した455例が観察されました。それは癒すことです。残りの454人は反応がなかった。

 

2.2診断結果

 

2.2.1対照群（非腫瘍患者および健常人）の合計160人の人々のうち、25人の患者の最大皮膚反応直径が25mmを超える患者のうち、陽性率は15.6％であった。 25人の患者のうち18人は患者であり、そのうち7人は慢性リンパ節炎およびリンパ結核であり、他は慢性乳房過形成および肝膿瘍であり、最長直径の平均長は28.6 mmであった。

 

2.2.2観察されたグループI（抗癌治療なしでは悪性腫瘍と診断されていない）合計191人の人々、早期癌の128症例、進行癌の63症例。 25 mmを超える早期癌4時間皮膚反応の合計107例、83.6％の陽性率。その中で、早期消化管癌の陽性率は92.8％（52/56）と高く、続いて91.3％（21/23）の早生および死亡泌尿器系癌であった。進行がんの陽性率は低く、平均陽性率はわずか39.7％でした。初期および後期における平均陽性率は69.6％であった。

 

2.2.3グループII（抗癌治療患者）の合計91人の患者が観察され、平均陽性率は49.5％であった。

 

2.2.4観察されたグループIII（未治療良性腫瘍患者）合計28例、8例陽性、平均陽性率は30.7％であった。

 

2.2.5 4群の陽性率の比較統計学的検定（X2）後、対照群と観察群Iの陽性率は腸癌として有意に異なった。臨床的に悪性腫瘍の疑いがあるが、皮膚テストは陰性であり、悪性腫瘍の典型的な症例の9症例は他の方法によって最終的に拒絶される。湖北省Yichang地区Wufeng郡のYuguan郷における子宮頚癌患者そのうち、7人が皮膚テスト陽性、1人が不審、1人が陰性でした。 3人を除いて、24人の癌以外の女性のうち、どれもポジティブな反応を示さず、一致率は高かった。

 

診断は癌、3例の皮膚テスト陽性患者、3mgのデキサメタゾンの脱感作、および2回目の皮膚テストは陽性のままであった。非癌性患者を有する７人の患者において、皮膚試験は陽性であり、そしてそれらのうちの５人は陰性であり、２人は陽性のままでありそして２人のうちの１人はアレルギー性であった。脱感作試験は、胎盤皮膚試験反応が特異的であることを証明した。

 

中国におけるヒト胎盤エキスの保存に関する報告はありません。本研究では、40℃保存と希釈溶液を比較した結果、希釈後保存されたヒト胎盤抽出物は4ヵ月後に有意な減少を示し（1：4）、保存前ODは0.07で4ヵ月後に減少した。 0.03、1：6希釈は保存前は0.06、4月以降は0.015に低下しました。未希釈の原液を４０℃で４ヶ月間貯蔵し、そして使用時に希釈した、力価は有意に減少しなかった。長期間保存の効果はまだ見られません。

 

要するに、この方法は簡単で実施が容易であり、悪性腫瘍、特に消化管および生殖管の癌の早期発見のための高い同時発生率を有する。我々の研究は他のレポーターより人間の10倍だけ多くなかった（P <0.001）;観察グループIと現在のグループII間の陽性率もまた有意に異なっていた（P <0.001）;対照グループは観察グループIIIと比較して有意ではなかった。違い

 

3.ディスカッション

 

簡便な癌検診方法は癌の早期発見のための重要な手段であり、ヒト胎盤抽出物の皮内反応を検査したユニットは少数あるが、安全性は低く、測定価格は難しく、観察数は少ない（数十ケース）。非転移性早期癌の平均陽性率は83.6％、特に早期消化管癌および尿生殖器癌で、陽性率はそれぞれ91.3〜92.8％であり、進行癌でも非癌でもありません。腫瘍患者の陽性率にも統計的に有意な差（15.6％）があり、臨床的に悪性腫瘍が疑われる症例が18例あり、皮膚検査が陽性であり、病理学的に確定した。腸管癌ではありますがX線はサポートしていませんが、皮膚テストは陽性であり、最後にシグモイド確認により信頼性を確認し、改善を図っています特に安全性のためにB型肝炎抗原の検出にはヒト胎盤血が使用されています。同時に、人体上の力価を測定する代わりに測光密度法を用いて保存時間と方法を研究した。それはこの方法のさらなる中間試験と大規模促進に有益である。 。